甲醛滴定法测定氨基酸的注意事项

分类:甲醛百科浏览量:2861发布于:2021-07-23 09:21:00

甲醛滴定法测定氨基酸的注意事项

原理:氨基酸是两性电解质,不能直接通过酸碱滴定来计算其含量.但在常温下,甲醛能迅速与氨基酸的氨基结合,生成羟甲基化合物,使上述平衡右移,促使-nh3释放h+

1、化学分析法——甲醛滴定法 甲醛滴定法用于氨基氮的测定, 可以测出样品中总氨基酸的含量,其原理是在中性或弱碱性水溶液中,氨基酸的α—氨基与醛类反应生Schiff碱:α—氨基酸与甲醛反应生成亚甲基亚氨基衍生物2、分光光度法——茚三酮法 茚三酮是一种能使氨基酸生成在可见光区有吸收的衍生试剂.该方法的基本原理是经阳离子交换柱分离出的氨基酸与茚三酮混合,经加热反应后,一级胺与之生成蓝紫色化合物,二级胺与之生成***化合物.两种衍生物使用双通道紫外检测器同步检测,检测波长分别为570nm 和436nm.

1、主要原因是在滴定终点时没有合适的指示剂,所以要选择不同的指示剂(即选择两种);2、滴定分析,为减少滴定误差,需要平行双样的测定.即需要滴定两次.

此为分析中的硬伤. 甲醛滴定法是通过分析样品中氮含量来推断氨基酸含量.利用此检测漏洞可向样品中加入氮肥硫酸铵、氯化铵制假. 正如检测乳制品中蛋白质含量一样,通过检测样品中氮含量来推断蛋白质,利用此检测漏洞可以添加氮含量高的尿素、三聚氰胺制假.

应该是先调到氨基酸的等电点吧

酚酞 8.2~10.0 无色~紫红 (1)0.1g指示剂溶于100mL60%乙醇中 (2)1g酚酞溶于100mL90%乙醇中百里酚酞 9.4~10.6 无色~蓝 0.1g指示剂溶于100mL90%乙醇中

水溶液中的氨基为兼性离子,因而不能直接用碱滴定氨基酸的羧基.甲醛可与氨基酸上的-n+h3结合形成-nh-ch2oh,-n(ch2-oh)2等羟甲基衍生物使n+h3上 h+游离出来.这样用碱滴定的n+h3放出h+测出氨基氮,从而计算氨基酸含量.

没有

蛋白、多肽或氨基酸中游离氨基-NH3+上的H+会被甲醛取代,生成—NH—CH2OH、—N(CH2—OH)2 等羟甲基衍生物,从而游离出H+.可以通过NaOH滴定来测定生成的H+从而测定游离氨基含量.

看颜色和表象的反应